Co to jest antybiogram?
Antybiogram jest testem mikrobiologicznym stosowanym do badania wrażliwości drobnoustroju na jeden lub więcej leków przeciwdrobnoustrojowych.
Antybiogram wykorzystywany głównie na poziomie sanitarnym jest tradycyjnie przeprowadzany na próbkach kolonii bakteryjnych pochodzących z jednostek pobranych przez wymaz z gardła, cewki moczowej, odbytnicy lub pochwy lub izolowanych z próbek kału, moczu lub plwociny.
Techniki wykonawcze i odporność na antybiotyki
Antybiogram często wykonuje się metodą dyfuzji agarowej, zwanej również techniką Kirby-Bauera.
Podczas zabiegu pobierana jest próbka bakterii z kolonii i wysiewana (odpowiednio usuwana) na odpowiednią glebę, w której rozprowadzane są także krążki nasączone antybiotykami w znanych stężeniach (podyktowane potrzebami terapeutycznymi). Płytkę umieszcza się następnie w inkubatorze i po określonym czasie (np. 18 godzin w 35 ° C) można ocenić względnie jednorodny wzrost drobnoustrojów, z mniej lub bardziej szerokimi halo wokół śliniaków papierowych. W oparciu o zasięg tych obszarów inhibicji ocenia się podatność bakterii na każdy testowany antybiotyk: jeśli średnica jest duża, mikroorganizm jest wrażliwy na lek (S), a jeśli jest mały, bakteria ma wrażliwość pośrednią (I lub MS), natomiast jeśli badany gatunek bakterii jest nieistotny lub nawet nieobecny, jest oporny na produkt leczniczy. Aby dokładnie określić wrażliwość bakterii, średnicę halo inhibicji mierzy się w mm, porównując uzyskane wartości ze standardowymi wartościami dla szczepu bakteryjnego.
Jak zapobiegać oporności na antybiotyki
Antybiotyki NIE są skuteczne przeciwko wirusom; Typowe infekcje wirusowe to przeziębienia, grypa, zapalenie krtani, zapalenie oskrzeli, zad i większość bólów gardła (zapalenie gardła).
Stosowanie antybiotyków, gdy nie są potrzebne (na przykład na przeziębienie lub grypę), może prowadzić do rozwoju oporności na antybiotyki (bakterie są „oporne na antybiotyki”, gdy nie mogą być zabite przez antybiotyk).
UWAGA: jest to bakteria odporna na antybiotyk, a NIE indywidualna. Dlatego nawet jeśli nigdy nie stosowałeś antybiotyków, możesz rozwinąć infekcje wywołane przez bakterie oporne na antybiotyki.
Aby zapobiec pojawieniu się oporności na antybiotyki, FUNDAMENTALne jest zakończenie leczenia zaleconego przez lekarza; nawet jeśli dobrze jest zatrzymać przedwcześnie antybiotyki.
Gdy podczas antybiogramu aureole sąsiednich dysków łączą się ze sobą, przedmiotowe antybiotyki są uważane za synergiczne.
Alternatywnie do opisanej powyżej metody, antybiogram można również przeprowadzić na podłożu płynnym, oceniając - po inkubacji - zmętnienie odpowiadające różnym stopniom rozcieńczenia leku (patrz poniżej).
Antybiogram stał się obecnie podstawowym testem, biorąc pod uwagę powszechne rozpowszechnienie zjawiska oporności na leki. Wybór niewłaściwego antybiotyku lub użycie leku o szerokim spektrum w celu uniknięcia tej procedury może w rzeczywistości wybrać szczepy bakteryjne odporne na działanie tego samego. W artykule poświęconym temu tematowi widzieliśmy, jak ta zdolność została pierwotnie uzyskana dla spontanicznych mutacji, a następnie przekazana innym bakteriom. Nie jest zatem przypadkiem, że odkrycie i kliniczne zastosowanie wielu antybiotyków poszło w parze z pojawieniem się bakterii odpornych na ich działanie. Usterki, często, niewłaściwego i przesadnego stosowania tych leków, na przykład do leczenia infekcji wirusowych, przeciwko którym okazują się całkowicie bezużyteczne (jedynym możliwym uzasadnieniem jest zapobieganie wszelkim nadkażeniom bakteryjnym u ludzi zagrożonych).
Dwa bardzo ważne parametry pochodzące z antybiogramu to MIC i MBC:
- MIC (minimalne stężenie hamujące; minimalne stężenie hamujące): jest to najniższe stężenie badanego związku niezbędne do zahamowania wzrostu danego drobnoustroju.
- MBC (minimalne stężenie bakterii): jest najniższym stężeniem badanego związku, koniecznym do spowodowania śmierci ponad 99, 9% danej populacji drobnoustrojów.
Aby ocenić MIC w podłożu stałym przez antybiogram, zakłada się, że czynnik mikrobiologiczny dyfunduje z dysku do agaru, tworząc gradient stężenia; w konsekwencji im dalej od dysku, tym niższe stężenie leku, które stopniowo zmniejsza się, aby osiągnąć stężenie krytyczne (minimalne przybliżone stężenie hamujące MIC). Poza tym punktem występuje zlewny wzrost, podczas gdy w obszarze najbliższym dysku wzrost jest nieobecny.
W antybiogramie na podłożu płynnym przygotowuje się serię probówek zawierających pożywkę hodowlaną i bada się skalowane rozcieńczenia (w stosunku 2) antybiotyku. W każdej z tych probówek zaszczepia się standardową ilość badanych drobnoustrojów; następuje inkubacja i badanie tego samego. Zgodnie z przewidywaniami, w obecności zmętnienia widoczny jest wzrost bakterii, podczas gdy roztwór pozostaje klarowny oznacza całkowite zahamowanie wzrostu drobnoustrojów, podkreślając optymalną skuteczność leku. W tym przypadku MIC (minimalne stężenie hamujące) reprezentuje najwyższe rozcieńczenie (tj. Najniższe stężenie) antybiotyku zdolnego do całkowitego zahamowania wzrostu mikroorganizmu. MBC (minimalne stężenie bakteriobójcze) jest zamiast tego ustalane przez hodowanie próbek pobranych z ciekłej pożywki w specjalnym podłożu stałym i ocenę możliwego wzrostu bakterii. MIC będzie zatem odpowiadać stężeniu antybiotyku obecnego w probówce, w której lek jest bardziej rozcieńczony i który w badaniu kulturowym nie wykazuje oznak aktywności bakterii (patrz rysunek).
Wyniki antybiogramu są publikowane w specjalnym raporcie, w którym wskazane są stosowane antybiotyki i powiązane MMC; czasami wymienia się także skojarzenia antybiotyków, które można stosować, oraz stopień odporności mikroorganizmów.
Tradycyjne metody wykonywania antybiogramu, bardzo przydatne do celów edukacyjnych, stale ewoluują. Obecnie dostępne są na przykład zautomatyzowane systemy komercyjne, a papierowe bibula można zastąpić paskami zawierającymi przyrostowe dawki antybiotyku, odpowiednio wskazanymi na samym pasku (test E na antybiogram).
