ogólność
Elektroforeza to technika stosowana w analizie laboratoryjnej, która wykorzystuje masę cząsteczkową i ładunek elektryczny białek do oceny ich ilości i jakości . W szczególności egzamin ten pozwala na rozdzielenie białek na pięć frakcji : albuminy, alfa 1 globulina, alfa 2 globulina, beta globulina i gamma globulina . Zmiana relacji między tymi typami białek wskazuje na pewne stany patologiczne. Elektroforezę można przeprowadzić na próbkach surowicy krwi, moczu lub innych płynach biologicznych, takich jak płyn (płyn mózgowo-rdzeniowy).
Zwany także elektroforezą białkową lub protidogrammą, test ten jest przeprowadzany przez przyjęcie bardzo szczególnej metody: pole elektryczne jest przykładane do próbki, dzięki czemu białka „grupy” według typu. W rzeczywistości każde z białek analizujących elektroforezę ma swoją własną masę cząsteczkową i ładunek elektryczny, co pozwala im na charakterystyczne reagowanie na stres, dostarczany przez prąd stały. Na przykład w normalnych warunkach pierwszy oczekiwany pik - wyższy i węższy - na ścieżce elektroforetycznej odpowiada albuminie .
W bardziej praktycznym ujęciu elektroforeza jest analizą używaną do określenia:
- Obecność nieprawidłowych białek;
- Brak normalnych białek;
- Jeśli grupa białek występuje w mniejszych lub większych ilościach niż norma.
Lekarz może zażądać elektroforezy w ramach badań kontrolnych (rutynowej analizy) lub procedury diagnostycznej, czyli w przypadku, gdy inne analizy laboratoryjne wykazały zmiany i konieczne jest pogłębienie lub potwierdzenie podejrzenia klinicznego.
Co
Elektroforeza jest analizą laboratoryjną, która dostarcza ważnych informacji o ilości białek obecnych w surowicy krwi lub innych próbkach biologicznych i, dla każdej frakcji, ujawnia, czy istnieją jakiekolwiek anomalie w zakresie jakości. Jest to możliwe dzięki zastosowaniu pola elektrycznego, wykorzystującego ruchliwość elektroforetyczną białek; na migrację tych makrocząsteczek wpływa ich masa, rozmiar, ładunek i kształt.
W szczególności test pozwala na rozdzielenie białek na pięć grup : albumina, alfa 1 globulina, alfa 2, beta i gamma .
Wynik elektroforezy pozwala na zbadanie stężenia tych parametrów: możliwa zmiana związku między tymi grupami białek jest obserwowana podczas niektórych stanów patologicznych. Dlatego elektroforeza jest przydatna w potwierdzaniu diagnozy i, po stwierdzeniu choroby, podążaniu za pacjentem w obserwacji .
Elektroforeza: na jakich próbkach można wykonać?
Próbki biologiczne, do których można zastosować elektroforezę, to głównie:
- Surowica : elektroforeza seroproteinowa lub elektroforeza białek surowicy;
- Mocz : elektroforeza w moczu lub elektroforeza białek moczu;
- Alkohol (płyn mózgowo-rdzeniowy) : elektroforeza białek płynnych (uwaga: płyn jest płynem, który przenika i chroni mózg, rdzeń kręgowy, nerwy czaszkowe i korzenie kręgosłupa).
Elektroforeza: co jest mierzone
Białka osocza są bardzo ważnymi wskaźnikami: wszelkie zmiany w ich stężeniach mogą sygnalizować obecność wielu chorób.
Dzięki elektroforezie możliwe jest oddzielenie następujących białek w próbce:
- Albumina ;
- Globuliny alfa 1 ;
- Globuliny alfa 2 ;
- Beta-globuliny ;
- Gamma globuliny .
Obecnie wiele laboratoriów przeprowadza 6-pasmową separację, tj. Z rozdzieleniem beta-globulin na dwie frakcje:
- Beta 1 globuliny ;
- Beta 2 globuliny .
Czy wiesz, że ...
W laboratorium elektroforeza jest jedną z najczęściej stosowanych technik analizy jakościowego i ilościowego składu białek. Ta metoda rozdzielania opiera się na różnej prędkości migracji cząstek naładowanych elektrycznie, poprzez roztwór i nośnik, pod wpływem pola elektrycznego .
Albumina jest najobficiej występującym białkiem surowicy i jednym z najważniejszych w organizmie. Jest on syntetyzowany przez wątrobę i jest zawarty przede wszystkim w płynach śródmiąższowych iw osoczu, gdzie sam stanowi około połowy krążących białek. Albumina pełni różne funkcje, w tym prawidłowe zarządzanie ciśnieniem osmotycznym i transport substancji, takich jak bilirubina.
Globuliny alfa 1 i 2 pełnią przede wszystkim funkcje transportu lipidów, tłuszczów i hormonów. Beta globuliny przenoszą także substancje obecne we krwi; do najbardziej znanych białek z tej grupy należą transferyna (stosowana do transportu żelaza) i beta-2 mikroglobulina. Gamma globuliny mają natomiast głównie funkcję przeciwciała.
Niektóre białka osocza są wytwarzane przez wątrobę (takie jak albumina), podczas gdy inne są uwalniane do krwi z komórek należących do układu odpornościowego (gamma globuliny).
Czytaj więcej: Białka osocza - funkcje i funkcje »Elektroforeza: podstawowa zasada
Wprowadzenie : ogólnie elektroforeza jest metodą rozdzielania opartą na różnej prędkości migracji cząstek naładowanych elektrycznie, przez roztwór i porowaty i obojętny nośnik (taki jak papier, żel agarozowy lub arkusz octanu celulozy), pod wpływem pola elektrycznego. Wiele cząsteczek o znaczeniu biologicznym (aminokwasy, peptydy, białka, DNA i RNA) posiada w swojej strukturze grupy zdolne do jonizacji, dlatego przy odpowiedniej wartości pH są one obecne w roztworze w postaci naładowanej elektrycznie. Pod wpływem pola elektrycznego te naładowane cząsteczki migrują w kierunku katody lub anody, w zależności od tego, czy mają ładunek dodatni ( kation ), czy ładunek ujemny ( aniony ).
Elektroforeza to metoda pozwalająca na rozdzielenie makrocząsteczek, aw szczególności białek na podstawie ich:
- Masa cząsteczkowa ;
- Ładunek elektryczny .
Po umieszczeniu w środowisku podstawowym białka zachowują się jak kwasy: grupa COOH różnych aminokwasów, które tworzą strukturę makrocząsteczki, dysocjuje na COO– (cząstka ujemna) i H + (jon dodatni). Białka są zatem ładowane jako całość w sensie negatywnym, a ich ruchliwość elektroforetyczna przechodzi z bieguna ujemnego (katody) na biegun dodatni, czyli w kierunku anody (ponieważ ładunki ujemne przewyższają ładunki dodatnie).
Wracając do badania, próbka pacjenta - zawierająca mieszaninę białek (np. Białek surowicy) - jest umieszczana na pasku elektroforetycznym, tj. Wsparcie migracji .
Oddzielenie w pięciu pasmach uzyskuje się przez zastosowanie pola elektrycznego, generowanego przez prąd stały, który pozwala różnym frakcjom białek na migrację w oparciu o ich masę i ładunek elektryczny.
Wynik - zwany ŚCIEŻKĄ ELEKTROFORETYCZNĄ - składa się z różnych szczytów i krzywych, którym odpowiadają frakcje białkowe, podzielone przez rodzaj i ilość, obecne w badanej cieczy:
- Zwykle pierwszym pikiem, wyższym i węższym, jest szczyt ALBUMINY ;
- Następnie obserwujemy szczyty GLOBULIN, znacznie niższe niż albuminy.
Wzrost lub spadek amplitudy i intensywności pików, które tworzą się na ścieżce, wskazują na większą lub mniejszą obecność białek w każdej kategorii.
Czy wiesz, że ...
Transtyretyna była wcześniej nazywana prealbuminą ze względu na jej większą ruchliwość elektroforetyczną w porównaniu z albuminą, co umożliwia jej migrację do bardziej anodowej pozycji.
Więcej informacji: Prealbumin - co to jest »Dlaczego to działa
Do czego służy elektroforeza?
Elektroforeza jest stosowana do diagnozowania lub monitorowania chorób, które mają wśród swoich wyników klinicznych zmianę stężenia białka w osoczu, moczu lub innych próbkach biologicznych.
Ta anomalia może wystąpić na przykład w przypadku:
- Choroby wątroby i nerek ;
- Zakażenia lub stany zapalne ;
- Szpiczak mnogi ;
- Stwardnienie rozsiane .
Elektroforeza: kiedy przepisuje się badanie?
WPROWADZENIE : dawka całkowitych białek we krwi - białaczka - i albuminy - albuminemia - jest zwykle uwzględniana w panelach kontrolnych, dlatego jest często stosowana w ocenie stanu zdrowia danej osoby . W rutynowej analizie zmiana tych parametrów może być uznana za DZWON ALARMU i może spowodować pogłębienie obrazu klinicznego, zwłaszcza jeśli pacjent wykazuje określoną symptomatologię.
Można przepisać elektroforezę BIAŁKA W SERUM :
- W przypadku, gdy inne testy laboratoryjne dają nienormalny wynik, pod względem braku lub mniejszej i większej ilości białek osocza w odniesieniu do normy;
- Kiedy obecność:
- Stan zapalny w toku;
- zakażenie;
- Choroba autoimmunologiczna;
- nefropatia;
- choroba wątroby;
- Choroby charakteryzujące się wytwarzaniem składnika monoklonalnego, to znaczy przeciwciał o tej samej identycznej strukturze chemicznej, takich jak:
- Szpiczak mnogi i jego warianty;
- Makroglobulinemia Waldenströma;
- Amyloidoza.
Gdy w moczu występuje wysokie stężenie białek, lekarz może poprosić o wykonanie elektroforezy białek moczowych. Badanie pozwala określić źródło zmiany, potwierdzając lub wspierając diagnozę.
Elektroforeza PROTEIN DEL LIQUOR może być przepisana, gdy podejrzewa się rozpoznanie stwardnienia rozsianego . W tym przypadku wyznaczony wzór elektroforetyczny jest charakterystyczny, ponieważ podkreśla obecność tak zwanych pasm oligoklonalnych, normalnie nie występujących w elektroforezie białek surowicy.
Po rozpoznaniu choroby elektroforezę można przeprowadzać w regularnych odstępach czasu, aby:
- Monitoruj chorobę z upływem czasu, a następnie postępuj zgodnie z jej przebiegiem (kontynuacja);
- Sprawdź skuteczność protokołu terapeutycznego .
Normalne wartości
U zdrowego dorosłego normalne stężenie całkowitego białka we krwi wynosi 6, 4-8, 3 grama na decylitr osocza (g / dl).
Albumina (elektroforeza seroproteinowa)
Albumina stanowi 59-69% całkowitych białek osocza.
- Wartość odniesienia Albumina: 3, 6-4, 9 g / dl
Globulina alfa 1
Globuliny alfa-1 stanowią 2, 0-3, 5% całkowitych białek osocza.
- Wartość odniesienia Alfa 1 globulina : 0, 2-0, 4 g / dl
Globuliny alfa 2
Globuliny alfa-2 stanowią 6-11% całkowitych białek osocza.
- Wartość odniesienia Globuliny alfa 2 : 0, 4-0, 8 g / dl
Beta globuliny
Beta globuliny stanowią 6-12% całkowitych białek osocza.
- Wartość referencyjna dla beta-globuliny: 0, 6-1 g / dl
Gamma globuliny
Gamma globuliny stanowią 9-20% całkowitych białek osocza.
- Wartość odniesienia Gamma globulina : 0, 9-1, 4 g / dl
Uwaga : przedział referencyjny egzaminu może się nieznacznie różnić w zależności od wieku, płci i oprzyrządowania używanego w laboratorium analitycznym. Z tego powodu lepiej jest sprawdzić zakresy wymienione bezpośrednio w raporcie. Należy również pamiętać, że wyniki analiz muszą być oceniane przez lekarza ogólnego, który zna historię medyczną pacjenta.
Wysokie wartości - przyczyny
Elektroforeza w surowicy: co powoduje wzrost wartości?
albumina
Odkrycie przy elektroforezie wzrostu albuminy w surowicy jest częste podczas stanów chorobowych, które odejmują wodę od organizmu i prowadzą do pojawienia się odwodnienia, w tym:
- Trwałe wymioty i biegunka;
- Rozległe oparzenia;
- Nadmierne pocenie się;
- Choroba Addisona;
- Śpiączka cukrzycowa.
W śledzeniu elektroforetycznym stężenie albuminy wyższe niż norma może wskazywać na:
- Sarkoidoza (ogólnoustrojowa choroba zapalna);
- Choroba Buergera lub zarosty tromboangioitowe (choroba atakująca naczynia krwionośne i tętnice).
ALFA 1 GLOBULINA
Globuliny alfa 1 zwiększają się w następujących przypadkach:
- Proces zapalny lub infekcja w toku;
- Zawał serca;
- Przyjmowanie pigułki antykoncepcyjnej;
- Ciąża.
ALFA 2 GLOBULINA
Wysokie wartości globulin alfa 2 mogą wskazywać na obecność:
- Choroby nerek;
- Zapalenie lub trwająca infekcja;
- Zawał serca;
- cukrzyca;
- Zespół Downa;
- Niektóre nowotwory złośliwe.
BETA GLOBULINA
Wzrost beta globulin w elektroforetycznym śladzie wskazuje na:
- Wysoki poziom cholesterolu we krwi (hipercholesterolemia);
- Niedokrwistość z niedoboru żelaza;
- Niektóre przypadki szpiczaka mnogiego;
- Ciąża.
ZAKRES GLOBULINY
W elektroforezie wzrost poliklonalnych gamma globulin może być związany z:
- Przewlekłe choroby zapalne;
- Niektóre choroby układu odpornościowego;
- Reumatoidalne zapalenie stawów;
- Toczeń rumieniowaty układowy;
- Przewlekłe choroby wątroby (takie jak zapalenie wątroby i marskość wątroby);
- Ostre i przewlekłe zakażenia.
Wysokie wartości monoklonalnych globulin gamma mogą wskazywać na obecność:
- Niektóre guzy;
- Szpiczak mnogi;
- chłoniaka;
- Makroglobulinemia Waldenströma.
Aby zidentyfikować, która globulina gamma jest obecna w paśmie monoklonalnym we wzorze elektroforetycznym, można kontynuować immunofiksację.
Elektroforeza moczu
Znaczny wzrost białka w moczu przez elektroforezę może wskazywać na nieprawidłowe działanie kłębuszków nerkowych i kanalików nerkowych .
Elektroforeza alkoholowa
Jeśli wyniki elektroforezy nie występują normalnie w płynie mózgowo-rdzeniowym lub są zwiększone, może wystąpić zapalenie, infekcja lub inne choroby układu nerwowego .
Odnalezienie pasm oligoklonalnych w śledzeniu elektroforetycznym wskazuje na stwardnienie rozsiane .
Niskie wartości - przyczyny
Elektroforeza w surowicy: co powoduje redukcję białka?
albumina
Redukcja albuminy w śledzeniu elektroforetycznym może być spowodowana przez wszystkie te warunki charakteryzujące się:
- Niedożywienie (w szczególności: niedobór białka spowodowany zmniejszonym spożyciem pokarmu);
- Złe wchłanianie wtórne do: enteropatii, celiakii, choroby Crohna, nietolerancji białek;
- Zwiększony katabolizm : ciężkie zapalenie, stany gorączkowe, wyniszczenie, nowotwory, nadczynność tarczycy, hiperkortyzolizm itp.
Piki albumin zmniejszają się także w następstwie patologii, które wpływają na wątrobę (brak zdolności do syntezy) i nerek (zwiększa eliminację).
Stężenie albuminy wykryte za pomocą elektroforezy w surowicy może się zmniejszyć, w szczególności, gdy zostaną ustalone:
- Marskość wątroby (jest najczęstszą przyczyną);
- Ostre i przewlekłe zapalenie wątroby;
- Anomalie genetyczne (synteza wadliwych albumin);
- Choroba nerek (zwłaszcza zespół nerczycowy i zapalenie kłębuszków nerkowych).
Odkrycie niskiej albuminy z elektroforezą obserwuje się również w ciąży w przypadku:
- Modyfikacje hormonalne, które zmieniają przepuszczalność naczyń i funkcjonalność wielu narządów kobiety ciężarnej;
- Zwiększone wykorzystanie białek przez płód.
ALFA 1 GLOBULINA
Globuliny alfa 1 są redukowane do elektroforezy w obecności:
- Ciężka choroba wątroby;
- Wrodzona rozedma płuc;
- Choroby nerek.
ALFA 2 GLOBULINA
Niskie wartości globulin alfa 2 mogą wskazywać na:
- niedożywienie;
- Ciężka choroba wątroby;
- Hemoliza.
BETA GLOBULINA
Zmniejszone stężenie beta globulin w śladzie elektroforezy może wskazywać:
- niedożywienie;
- Marskość wątroby.
ZAKRES GLOBULINY
Niskie wartości gamma globulin mogą wskazywać na obecność różnych chorób układu odpornościowego.
Elektroforeza moczu
Zwykle w elektroforezie stwierdza się małe stężenie białka w moczu. Dlatego wynik ten nie wskazuje na obecność niektórych chorób.
Elektroforeza alkoholowa
W normalnych warunkach stężenie całkowitych białek w cieczy jest bardzo niskie. Odkrycie wartości zredukowanych do elektroforezy nie koreluje zatem z określonym patologicznym znaczeniem.
Jak to jest wykonywane
Elektroforeza: na czym polega egzamin
- Elektroforeza serwatki (badanie krwi) : aby uzyskać śledzenie elektroforetyczne w surowicy, konieczne jest pobranie prostej próbki krwi z żyły ramienia. Następnie surowicę otrzymuje się przez oddzielenie frakcji zawierającej komórki od ciekłej.
- Elektroforeza białek w moczu (analiza moczu) : konieczne jest pobranie małej ilości moczu w specjalnym sterylnym pojemniku. Na podstawie wskazań lekarza i laboratorium próbkę można pobrać bez dokładnego pomiaru czasu ( losowo ) lub w ciągu 24 godzin .
- Elektroforeza alkoholowa (analiza płynu mózgowo-rdzeniowego) : wymaga zebrania niewielkiej ilości płynu poprzez wprowadzenie igły do jamy kręgosłupa ( nakłucie lędźwiowe ).
przygotowanie
Elektroforeza: czy przygotowanie jest wymagane?
- Przed pobraniem krwi niektóre laboratoria mogą wymagać od ciebie postu trwającego co najmniej 10-12 godzin. W tym czasie dozwolona jest niewielka ilość wody.
- Elektroforezę można przeprowadzić na moczu pobranym o określonej porze dnia (losowo) lub w ciągu 24 godzin, dlatego konieczne jest wcześniejsze uzyskanie odpowiednich sterylnych pojemników.
- Jednak w przypadku elektroforezy alkoholowej nie jest wymagane specjalne przygotowanie.
Co może zmienić wynik egzaminu?
Niektóre leki mogą wpływać na wynik elektroforezy, dlatego zaleca się zgłaszanie lekarzowi wszelkich trwających terapii. Leki, które mogą zmienić wyniki kliniczne, obejmują doustne środki antykoncepcyjne, sterydy anaboliczne, androgeny, hormony wzrostu, insulinę i antybiotyki.
Inne czynniki, które mogą mieć wpływ na egzamin, to:
- Hiperlipidemia (obecność wielu tłuszczów we krwi);
- Podawanie dużych ilości płynów dożylnych;
- Dieta wegetariańska;
- Zhemolizowane próbki (jeśli przeprowadza się elektroforezę na surowicy).
Interpretacja wyników
Ścieżka elektroforezy jest oceniana w połączeniu z wynikami innych analiz i dostarcza informacji o stanie zdrowia pacjenta.
Zmniejszenie lub wzrost w porównaniu ze standardem białek w elektroforezie w surowicy, moczu lub kąpieli wskazuje na obecność różnych chorób, zidentyfikowanych na podstawie parametru, na który wpływa zmiana.
Należy zawsze pamiętać, że wartości odniesienia mogą się zmieniać z jednego laboratorium do drugiego. Dlatego ważne jest, aby skonsultować się z lekarzem podstawowej opieki zdrowotnej lub specjalistą w zakresie czytania i interpretacji wyników.
